各位老铁们好，相信很多人对结晶紫染色时间都不是特别的了解，因此呢，今天就来为大家分享下关于结晶紫染色时间以及结晶紫染色拍照诀窍的问题知识，还望可以帮助大家，解决大家的一些困惑，下面一起来看看吧！
本文目录
- 请问各位大虾革兰氏染色中结晶紫的作用是什么谢谢
- 结晶紫染液、番红染液如何配制
- 求细胞侵袭实验用的结晶紫染色 ***
- 谁能告诉我结晶紫染色法测定生物膜的详细步骤
- 结晶紫染色 细胞形态不清晰
- 结晶紫染色 ***
- 结晶紫染色的原理是什么染细胞的哪个部分
一、请问各位大虾革兰氏染色中结晶紫的作用是什么谢谢
革染是复染，分两次染色进行，结晶紫用于初染，使革兰氏阳 *** 菌和革兰氏阴 *** 菌都被染成紫色。然后用碘液进行媒染，碘和结晶紫形成复合物。由于阳 *** 菌和阴 *** 菌细胞壁的结构差异，导致洗脱过程中复合物可以透过阴 *** 菌的细胞壁出去，变成无色的。复染时红色染料使阴 *** 菌染成红色。而阳 *** 菌则不然，它不能使复合物被洗脱，仍停留在细胞内，显现紫色。所以经过复染，红加紫仍是紫色。以此来区分革兰氏阳 *** 菌和阴 *** 菌。
二、结晶紫染液、番红染液如何配制
1、结晶紫染液：结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸铵水溶液80mL将两液混匀置24h后过滤即成。
2、番红溶液：番红O(safranine，又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL，溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
结晶紫染液、番红染液都是革兰氏染色液的两种主要试剂，革兰氏染色剂不仅用来观察细菌的形态，而且它还是细菌鉴定的重要 *** ，它可将全部细菌区分别革兰氏阳 *** 菌和阴 *** 菌两大类。
涂片→固定→结晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脱色→番红复染→水洗→干燥→观察。
1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-1 *** 细胞的培养液（含10%小牛血清的RPMI-1 *** 0培养液），37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。
2、用RPMI-1 *** 0培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。
对照孔6个，3个阳 *** 对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1 *** 0培养液，3个阴 *** 对照孔各加100μl RPMI-1 *** 0培养液。继续培养18～24小时。
3、甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4、吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。
5、轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6、测定前，每孔加0.1ml 33%醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活 ***
参考资料：百度百科—结晶紫染液
三、求细胞侵袭实验用的结晶紫染色 ***
①用棉签擦去基质胶和上室内的细胞
这种 *** 有如下优势：(1).不需要固定细胞，直接染色即可。(2).配制简单方便。(3).染色后可以用33%醋酸脱色，将结晶紫完全洗脱下来，洗脱液可在酶标仪上570nm测其OD值，间接反映细胞数。
结晶紫一染就出来了，我做的时候没做固定，用的结晶紫浓度较高0.5%，摇了5分多钟的板子，镜下就直接可以看到染上色的细胞了。
四、谁能告诉我结晶紫染色法测定生物膜的详细步骤
1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-1 *** 细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1 *** 0培养液），37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。
2．用RPMI-1 *** 0培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳 *** 对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1 *** 0培养液，3个阴 *** 对照孔各加100μl RPMI-1 *** 0培养液。继续培养18～24小时。
3．甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10％甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4．吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。
5．轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6．测定前，每孔加0.1ml 33％醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活 ***
五、结晶紫染色 细胞形态不清晰
因为，结晶紫染色是不会区分出细胞核和细胞质的。苏木精染细胞核成紫色，易红染细胞质成粉色。这些是原理。细胞形态不清晰原因：没固定好，细胞破碎。改4%的中 *** 多聚 *** 试试。2，染色时间长，改为10-15min。3，没清洗干净，多洗几遍，4，最重要的：结晶紫染色本身就不清晰，就是为了计算细胞数目，方便才这样。要是为了观察结构，就不要用结晶紫了。另附上我的 *** 一张。
六、结晶紫染色 ***
1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-1 *** 细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1 *** 0培养液），37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。
2．用RPMI-1 *** 0培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳 *** 对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1 *** 0培养液，3个阴 *** 对照孔各加100μl RPMI-1 *** 0培养液。继续培养18～24小时。
3．甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10％甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4．吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。
5．轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6．测定前，每孔加0.1ml 33％醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活 ***
七、结晶紫染色的原理是什么染细胞的哪个部分
1、结晶紫是一种碱 *** 染料，可以和细胞核中的DNA结合，从而产生细胞核染色。
2、结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。用于革兰氏染色。
3、结晶紫也可称之为龙胆紫。当它溶解后，可以被活细胞摄入。同时可以使DNA、蛋白质、脂肪着色。染色显示细胞核呈蓝色，细胞质呈粉红色。肉眼显示整个细胞呈深蓝色。在分光光度计或酶标仪上可以进行定量分析以评价细胞生长繁殖情况。
4、染色法着色灭活菌是细菌形态学检测的常用 *** ，广泛应用于临床实验室。而 *** 细菌的着色检测有实际应用价值。为此我们首次通过苯胺染料结晶紫染色细菌，探讨 *** 细菌着色的更佳浓度和染色时间，并对细菌保存液加以改进，旨在为 *** 细菌染色的形态学检测建立 *** 。
5、GENMED结晶紫细胞染色试剂是一种旨在使粘附生长的单细胞层细胞（群落）摄取结晶紫染料而获得细胞繁殖密度定量信息的广谱染色材料和权威而经典的技术 *** 。该技术由 *** 级科学家精心研制、成功实验证明、 *** *** 推荐的。其适用的细胞是呈单细胞层（Monolayer）生长的 *** 和动物细胞。产品严格无菌，即到即用， *** 能长期稳定，细胞着色率100%。
6、结晶紫也可称之为龙胆紫。当它溶解后，可以被活细胞摄入。同时可以使DNA、蛋白质、脂肪着色。染色显示细胞核呈蓝色，细胞质呈粉红色。肉眼显示整个细胞呈深蓝色。在分光光度计或酶标仪上可以进行定量分析以评价细胞生长繁殖情况。
7、参考资料来源：百度百科-草酸铵结晶紫染液
文章分享结束，结晶紫染色时间和结晶紫染色拍照诀窍的 *** 你都知道了吗？欢迎再次光临本站哦！
